به عنوان ابزاری که به طور گسترده در آزمایشگاه ها استفاده می شود، دقت عملکرد پیپت ها به طور مستقیم با دقت نتایج تجربی مرتبط است. عوامل زیر بر دقت پیپت ها تأثیر می گذارد:
I. عوامل محیطی
1. دما
- هنگامی که دمای اتاق پایین و دمای دست زیاد است، پیپت در هنگام مکیدن محلول های سرد مستعد خطا است. این به این دلیل است که دمای دست باعث انبساط هوا در پیپت می شود و در نتیجه حجم مایع مکیده را تغییر می دهد. به عنوان مثال، در یک محیط با دمای پایین، اگر از پیپت برای مکیدن مایع استفاده می کنید، اگر تأثیر دمای دست روی پیپت را در نظر نگیرید، مقدار مایع مکش شده ممکن است بیشتر یا کمتر از مقدار تنظیم شده واقعی باشد که بر روی پیپت تأثیر می گذارد. دقت نتایج تجربی
2. فشار هوا
- اگرچه نتایج جستجو به صراحت به آن اشاره نمی کند، اما از اصل کار پیپت حدس زده می شود که تغییرات فشار هوا ممکن است بر دقت تأثیر بگذارد. مثلاً در ارتفاعات مختلف، فشار هوا با هم تفاوت دارد. اگر آزمایشگاه پیپت را مطابق با آن کالیبره نکند، فشار هوا ممکن است باعث مکیدن پیپت و تخلیه مقادیر نادرست مایع شود.
2. عوامل ابزار
1. سفتی هوا
- سایش طولانی مدت بین محل اتصال بالای پیپت و بدنه اصلی پیپت و همچنین ستون بالایی باعث کاهش سفتی هوا و در نتیجه خطا می شود. هنگامی که سفتی هوا خوب نیست، ممکن است هوا در طول فرآیند مکیدن و تخلیه مایع نشت کند و در نتیجه حجم مایع نادرست باشد.
2. سرعت مکش
- سرعت زیاد آسپیراسیون به راحتی می تواند باعث ایجاد حباب در نوک پیپت شود و حباب ها ممکن است نوک آن را آلوده کنند. وجود حباب ها فضای مشخصی را اشغال می کند و باعث می شود حجم واقعی مایع مکیده شده کمتر از حجم تنظیم شده باشد و در نتیجه بر دقت تأثیر می گذارد.
3. عوامل مرتبط با عملیات
1. عادات عملیاتی اپراتور
- اگر اپراتور هنگام تنظیم ولوم پیپتینگ به درستی عمل نکند، مانند تنظیم از حجم زیاد به حجم کم یا از حجم کم به حجم زیاد، در صورت عدم رعایت روش صحیح اپراتور، دقت را تحت تأثیر قرار می دهد. به عنوان مثال، هنگام تنظیم از یک حجم بزرگ به یک حجم کوچک، اگر مقیاس برای تنظیم معمولی در جهت عقربه های ساعت چرخانده نشود. هنگام تنظیم از حجم کوچک به حجم زیاد، اگر مقیاس در خلاف جهت عقربههای ساعت به مقیاسی که از حجم تنظیمشده بیشتر است تنظیم نشود و سپس به میزان تنظیم شده تنظیم نشود، ممکن است در دقت پیپت کردن مشکل ایجاد کند.
- هنگام مونتاژ نوک پیپت، عملکرد نامناسب نیز بر دقت تأثیر می گذارد. به عنوان مثال، هنگام نصب نوک پیپت تک کانال، اگر انتهای پیپت به صورت عمودی در نوک قرار نگیرد و کمی به چپ و راست بچرخد تا سفت شود، ممکن است نوک آن محکم نصب نشده باشد یا آب بندی خوب نباشد و این موضوع تاثیر می گذارد. دقت پیپت کردن
2. وضعیت در حین پیپت کردن
- در هنگام تنفس مایع، اگر پیپت در حالت عمودی قرار نگیرد، یا عمق نوک تفنگ وارد شده به سطح مایع مناسب نباشد (مثلاً 2-3 میلی متر زیر سطح مایع وارد نشده باشد)، بر دقت پیپت کردن تاثیر می گذارد. علاوه بر این، اگر مایع قبل از آسپیراسیون برای خیس کردن نازل آسپیراسیون چندین بار مکیده و آزاد نشود (مخصوصاً در هنگام آسپیراسیون ویسکوز یا مایعاتی با چگالی متفاوت از آب)، ممکن است باعث عدم دقت حجم مایع آسپیره شده نیز شود.
IV. عوامل مرتبط با معرف
1. تبخیر معرف ها
- هنگامی که یک معرف فرار کشیده می شود، بخار وارد نوک پیپت می شود و باعث افزایش فشار داخلی می شود. هنگامی که مایع خارج می شود، فشار افزایش می یابد و در نتیجه خطا ایجاد می شود. با این حال، این وضعیت را می توان با مکش مکرر 4-5 بار بهبود بخشید.
2. ویسکوزیته و چگالی معرف ها
- اگرچه نتایج جستجو به طور مستقیم به آن اشاره نمی کند، اما در عملیات واقعی، اگر ویسکوزیته و چگالی معرف با آب متفاوت باشد، در صورت عدم انجام عملیات ویژه (مانند تنفس و رها کردن چندین بار برای خیس کردن نازل پیپت)، آن را انجام می دهد. بر دقت پیپت تأثیر می گذارد. به عنوان مثال، یک معرف با ویسکوزیته بالا ممکن است آسان نباشد که به طور کامل آسپیره یا تخلیه شود، و یک معرف با چگالی بالا ممکن است به مکش بیشتری نیاز داشته باشد تا به دقت حجم مربوطه را جذب کند.